Bildung von DNA‐Addukten durch α‐ und β‑Asaron in primären Rattenhepatozyten
- Natürliche Inhaltstoffe von Lebensmitteln können ein gentoxisches Potential haben. Ein Beispiel
dafür sind Phenylpropanoiden, welche als sekundäre Pflanzeninhaltsstoffe in einer Vielzahl von
Gewürz- und Kräuterpflanzen vorkommen. Zu den prominenten Vertretern dieser Stoffe gehören
Estragol und Methyleugenol. Beide allylische Verbindungen wirken hepatokanzerogen im
Tierversuch, wobei als ultimales Kanzerogen die Bildung eines Carbeniumions infolge einer
spontanen Abspaltung eines Sulfatrestes nach Hydroxylierung und anschließender Sulfonierung
der Seitenkette postuliert wird. Dieses Carbeniumion ist in der Lage mit Nukleophilen wie Proteinen
und DNA Addukte zu bilden. α‐ und β‐Asaron nehmen im Gesamtkontext der Phenylpropene eine
Sonderstellung ein, denn im Gegensatz zu anderen 1‑propenylischen Phenylpropenen wie Anethol,
Methylisoeugenol und Isosafrol sind sie wie die allylischen Verbindungen Estragol und
Methyleugenol kanzerogen im Tierversuch.
Zu Beginn der vorliegenden Promotionsarbeit war der Metabolismus von α‐ und β‑Asaron
weitestgehend unbekannt. Aus früheren Studien leitete sich die Hypothese ab, dass die beiden
1‑propenylischen Asarone, nicht wie die allylischen Vertreter über Hydroxylierung und
anschließender Sulfonierung metabolisiert und somit aktiviert werden, sondern eine Epoxidierung
der Seitenkette zu reaktiven Metaboliten führen könnte. Nachdem das Metabolitenspektrum von
α‐ und β‐Asaron aufgeklärt wurde und die Epoxide als verantwortlich für das mutagene Potential
der Verbindungen im Ames-Fluktuationstest identifiziert werden konnten, sollte die Frage der
DNA-Adduktbildung in primären Rattenhepatozyten beantwortet werden. Hierfür wurde die
Reaktivität der Asaronepoxide gegenüber 2′-Desoxynukleosiden untersucht und die gebildeten
Addukte charakterisiert. In einer in-vitro-Studie konnte mit Hilfe einer sensitiven UHPLC-MS/MSMethode
ein konzentrationsabhängiger Zusammenhang zu den gebildeten DNA-Addukten
festgestellt werden. Weiter wurden in Untersuchungen zur Zeitabhängigkeit Hinweise auf Reparatur
der gebildeten Addukte gefunden.